环境微生物学实验方法与技术

第一部分　基础微生物实验方法与技术第一章　显微技术 第一节　常用显微镜的构造 一、普通光学显微镜（general microscope） 二、暗视野显微镜（暗场显微镜）（dark—field microscope） 三、相差显微镜（phase microscope） 四、荧光显微镜（Flurecenee Microscope） 五、电子显微镜 第二节　常用显微镜的使用方法及注意事项 一、普通光学显微镜的使用方法及注意事项 二、暗视野显微镜的使用方法及注意事项 三、相差显微镜的使用方法及注意事项 四、荧光显微镜的使用方法及注意事项第二章　微生物制片及染色技术 第一节　微生物的制片方法 一、压滴标本制作无菌操作制片 二、悬滴标本制作 三、涂片法　　四、插片法　　五、搭片法　　六、玻璃纸法　　七、压片法（也称印片法）　　八、透明薄膜培养法　　九、单细胞菌块　 十、其他方法 第二节　微生物染色技术及形态观察 一、染色基本原理及染料种类的选择　　实验2.1　细菌单染色法及形态的观察　　实验2.2　细菌的革兰染色法　　实验2.3　细菌鞭毛染色及运动的观察　　实验2.4　细菌芽孢、荚膜的染色及观察　　实验2.5　放线菌活体染色及形态观察　　实验2.6　霉菌的活体染色及形态观察第三章　灭菌与除菌 第一节　实验室常用灭菌方法 一、热灭菌 二、过滤除菌 三、紫外线杀菌 四、化学药剂消毒与杀菌 第二节　各类培养基常采用的灭菌方法及注意事项 一、各类培养基的灭菌法 二、培养基灭菌的注意事项第四章　培养基的配制 第一节　培养基的配制原则 一、选择适宜的营养物质 二、营养物质浓度及配比合适 三、控制pH值条件 第二节　培养基的种类及配置过程 一、培养基的种类 二、培养基的配制方法　　实验4.1　常用培养基的配置第五章　微生物接种与培养技术 第一节　微生物的接种技术 实验5.1　微生物的各种接种方法　第二节　微生物的培养技术 一、微生物培养的一般问题 二、好气性微生物培养法 三、厌气性微生物培养法 实验5.2　用厌氧袋法培养丙酮丁醇梭状芽孢杆菌第六章　微生物的分离及鉴定技术 第一节　微生物的纯种分离方法 一、稀释混合倒平板法 二、稀释涂布平板法 三、平板划线分离法 实验6.1　土壤微生物的分离技术 第二节　微生物生长的测定技术 一、生长测定 二、繁殖测定 三、群体生长规律——生长曲线测定 实验6.2　微生物菌体大小的测定方法 实验6.3　微生物数量的测定 实验6.4　微生物生长曲线的测定 第三节 微生物生理特征测定技术 实验6.5 微生物需氧性的测定 实验6.6 微生物最适生长温度的测定 实验6.7 微生物生长pH值范围的测定 实验6.8 固氮能力的检测 第四节 微生物生化特征测定技术 实验6.9 糖类发酵实验 实验6.10 甲基红试验 实验6.11 淀粉水解试验 实验6.12 纤维素水解试验 实验6.13 果胶水解试验 实验6.14 细胞色素氧化酶试验 实验6.15 过氧化氢酶试验 实验6.16 TTC试验 实验6.17 硝酸盐还原试验 实验6.18 a淀粉酶活力的测定方法 实验6.19 蛋白酶活力的测定方法第七章 菌种保藏技术 实验7.1 菌种的保藏方法 第二部分 环境微生物生态学实验方法与技术第八章 环境因素对微生物生长与死亡的影响 第一节 营养和氧气对微生物生长发育的影响 实验8.1 营养元素对微生物生长的影响 实验8.2 氧和CO2浓度对微生物生长的影响 第二节 物理和化学因素对微生物生长发育的影响 实验8.3 温度对微生物生长的影响 实验8.4 渗透压对微生物生长的影响 实验8.5 氢离子浓度对微生物生长的影响 实验8.6 化学药剂对微生物生长的影响第九章 土壤微生物的生物量的测定方法 实验9.1 土壤微生物生物量碳的测定 实验9.2 土壤微生物生物量氮的测定 实验9.3 土壤微生物生物量磷的测定 实验9.4 土壤微生物生物量硫的测定第十章 微生物多样性的测定方法 第一节 PCR技术的基本原理与方法 实验10.1 PCR扩增技术与方法 实验10.2 微生物总DNA中的16SrDNA PCR扩增技术 实验10.3 凝胶中DNA的回收、测序及系统发育树的构建 第二节 微生物多样性的测定方法 实验10.4 Biolog分析方法 实验10.5 PLFA分析方法 实验10.6 PCR—DGGE分析方法 第三部分 环境微生物监测与评价技术第十一章 水中微生物监测 第一节 水样的采集和保存 一、采样 二、样品保存 第二节 水体中微生物数量的监测 实验11.1 水中细菌总数的监测 实验11.2 水中大肠菌群（Coliform group）的监测 实验11.3 水中粪链球菌的监测 实验11.4 水中病毒的监测 实验11.5 水体沉积物中的H2S产生菌的测定 实验11.6 循环水冷却系统中有关的微生物监测 实验11.7 应用PCR与基因DNA分子探针监测污染水体大肠杆菌 实验11.8 富营养化湖泊中藻类的监测（叶绿素a法） 实验11.9 PFU微型生物群落监测法第十二章 土壤中微生物的监测 第一节 土样的采集及保存 一、土壤环境样品采集 二、样品的处理与保存 第二节 土壤中微生物数量及组成的监测 实验12.1 土壤中微生物数量的监测 实验12.2 微生物在自然界氮素循环中的作用 实验12.3 利用16SrDNA方法分析不同污染土壤中微生物种群的变化第十三章 空气中微生物的监测 第一节 空气的采样方法及保存 一、样品的采集方法 第二节 空气中微生物数量的监测 实验13.1 空气中细菌数量的监测第十四章 生物毒理学检测与评价 实验14.1 发光菌的生物毒性测试方法 实验14.2 根据硝化细菌的相对代谢率检测环境污染物的综合生物毒性实验 实验14.3 采用细菌脱氢酶检测化合物毒性——水质毒性快速测定仪法 实验14.4 用Ames法检测环境中致癌物 第四部分 污染物微生物处理与资源化技术第十五章 污染物微生物处理技术 第一节 废水生物处理中的活性污泥 实验15.1 活性污泥微生物的显微镜观察及微型动物的计数 实验15.2 活性污泥中丝状微生物的鉴别 实验15.3 活性污泥脱氢酶活性的测定 实验15.4 活性污泥耗氧速率、废水可生化性及毒性的测定 第二节 微生物在污染物降解中的应用 实验15.5 光合细菌的培养及其对高浓度有机废水的净化作用 实验15.6 酚降解微生物的分离和解酚能力的测定 实验15.7 微生物对有机磷农药的降解 实验15.8 微生物对表面活性剂的降解 实验15.9 微生物细胞的固定化及其在废水生物处理中的应用 实验15.10 微生物吸附法去除重金属 实验15.11 生物过滤法对含氨废气的处理第十六章 固体废物处理与资源化方法 实验16.1 垃圾堆肥中纤维素分解菌的计数和分离 实验16.2 利用酒精废液生产单细胞蛋白 实验16.3 固体废物的固体发酵参考文献

第一部分　基础微生物实验方法与技术第一章　显微技术 第一节　常用显微镜的构造 一、普通光学显微镜（general microscope） 二、暗视野显微镜（暗场显微镜）（dark—field microscope） 三、相差显微镜（phase microscope） 四、荧光显微镜（Flurecenee Microscope） 五、电子显微镜 第二节　常用显微镜的使用方法及注意事项 一、普通光学显微镜的使用方法及注意事项 二、暗视野显微镜的使用方法及注意事项 三、相差显微镜的使用方法及注意事项 四、荧光显微镜的使用方法及注意事项第二章　微生物制片及染色技术 第一节　微生物的制片方法 一、压滴标本制作无菌操作制片 二、悬滴标本制作 三、涂片法　　四、插片法　　五、搭片法　　六、玻璃纸法　　七、压片法（也称印片法）　　八、透明薄膜培养法　　九、单细胞菌块　 十、其他方法 第二节　微生物染色技术及形态观察 一、染色基本原理及染料种类的选择　　实验2.1　细菌单染色法及形态的观察　　实验2.2　细菌的革兰染色法　　实验2.3　细菌鞭毛染色及运动的观察　　实验2.4　细菌芽孢、荚膜的染色及观察　　实验2.5　放线菌活体染色及形态观察　　实验2.6　霉菌的活体染色及形态观察第三章　灭菌与除菌 第一节　实验室常用灭菌方法 一、热灭菌 二、过滤除菌 三、紫外线杀菌 四、化学药剂消毒与杀菌 第二节　各类培养基常采用的灭菌方法及注意事项 一、各类培养基的灭菌法 二、培养基灭菌的注意事项第四章　培养基的配制 第一节　培养基的配制原则 一、选择适宜的营养物质 二、营养物质浓度及配比合适 三、控制pH值条件 第二节　培养基的种类及配置过程 一、培养基的种类 二、培养基的配制方法　　实验4.1　常用培养基的配置第五章　微生物接种与培养技术 第一节　微生物的接种技术 实验5.1　微生物的各种接种方法　第二节　微生物的培养技术 一、微生物培养的一般问题 二、好气性微生物培养法 三、厌气性微生物培养法 实验5.2　用厌氧袋法培养丙酮丁醇梭状芽孢杆菌第六章　微生物的分离及鉴定技术 第一节　微生物的纯种分离方法 一、稀释混合倒平板法 二、稀释涂布平板法 三、平板划线分离法 实验6.1　土壤微生物的分离技术 第二节　微生物生长的测定技术 一、生长测定 二、繁殖测定 三、群体生长规律——生长曲线测定 实验6.2　微生物菌体大小的测定方法 实验6.3　微生物数量的测定 实验6.4　微生物生长曲线的测定 第三节 微生物生理特征测定技术 实验6.5 微生物需氧性的测定 实验6.6 微生物最适生长温度的测定 实验6.7 微生物生长pH值范围的测定 实验6.8 固氮能力的检测 第四节 微生物生化特征测定技术 实验6.9 糖类发酵实验 实验6.10 甲基红试验 实验6.11 淀粉水解试验 实验6.12 纤维素水解试验 实验6.13 果胶水解试验 实验6.14 细胞色素氧化酶试验 实验6.15 过氧化氢酶试验 实验6.16 TTC试验 实验6.17 硝酸盐还原试验 实验6.18 a淀粉酶活力的测定方法 实验6.19 蛋白酶活力的测定方法第七章 菌种保藏技术 实验7.1 菌种的保藏方法 第二部分 环境微生物生态学实验方法与技术第八章 环境因素对微生物生长与死亡的影响 第一节 营养和氧气对微生物生长发育的影响 实验8.1 营养元素对微生物生长的影响 实验8.2 氧和CO2浓度对微生物生长的影响 第二节 物理和化学因素对微生物生长发育的影响 实验8.3 温度对微生物生长的影响 实验8.4 渗透压对微生物生长的影响 实验8.5 氢离子浓度对微生物生长的影响 实验8.6 化学药剂对微生物生长的影响第九章 土壤微生物的生物量的测定方法 实验9.1 土壤微生物生物量碳的测定 实验9.2 土壤微生物生物量氮的测定 实验9.3 土壤微生物生物量磷的测定 实验9.4 土壤微生物生物量硫的测定第十章 微生物多样性的测定方法 第一节 PCR技术的基本原理与方法 实验10.1 PCR扩增技术与方法 实验10.2 微生物总DNA中的16SrDNA PCR扩增技术 实验10.3 凝胶中DNA的回收、测序及系统发育树的构建 第二节 微生物多样性的测定方法 实验10.4 Biolog分析方法 实验10.5 PLFA分析方法 实验10.6 PCR—DGGE分析方法 第三部分 环境微生物监测与评价技术第十一章 水中微生物监测 第一节 水样的采集和保存 一、采样 二、样品保存 第二节 水体中微生物数量的监测 实验11.1 水中细菌总数的监测 实验11.2 水中大肠菌群（Coliform group）的监测 实验11.3 水中粪链球菌的监测 实验11.4 水中病毒的监测 实验11.5 水体沉积物中的H2S产生菌的测定 实验11.6 循环水冷却系统中有关的微生物监测 实验11.7 应用PCR与基因DNA分子探针监测污染水体大肠杆菌 实验11.8 富营养化湖泊中藻类的监测（叶绿素a法） 实验11.9 PFU微型生物群落监测法第十二章 土壤中微生物的监测 第一节 土样的采集及保存 一、土壤环境样品采集 二、样品的处理与保存 第二节 土壤中微生物数量及组成的监测 实验12.1 土壤中微生物数量的监测 实验12.2 微生物在自然界氮素循环中的作用 实验12.3 利用16SrDNA方法分析不同污染土壤中微生物种群的变化第十三章 空气中微生物的监测 第一节 空气的采样方法及保存 一、样品的采集方法 第二节 空气中微生物数量的监测 实验13.1 空气中细菌数量的监测第十四章 生物毒理学检测与评价 实验14.1 发光菌的生物毒性测试方法 实验14.2 根据硝化细菌的相对代谢率检测环境污染物的综合生物毒性实验 实验14.3 采用细菌脱氢酶检测化合物毒性——水质毒性快速测定仪法 实验14.4 用Ames法检测环境中致癌物 第四部分 污染物微生物处理与资源化技术第十五章 污染物微生物处理技术 第一节 废水生物处理中的活性污泥 实验15.1 活性污泥微生物的显微镜观察及微型动物的计数 实验15.2 活性污泥中丝状微生物的鉴别 实验15.3 活性污泥脱氢酶活性的测定 实验15.4 活性污泥耗氧速率、废水可生化性及毒性的测定 第二节 微生物在污染物降解中的应用 实验15.5 光合细菌的培养及其对高浓度有机废水的净化作用 实验15.6 酚降解微生物的分离和解酚能力的测定 实验15.7 微生物对有机磷农药的降解 实验15.8 微生物对表面活性剂的降解 实验15.9 微生物细胞的固定化及其在废水生物处理中的应用 实验15.10 微生物吸附法去除重金属 实验15.11 生物过滤法对含氨废气的处理第十六章 固体废物处理与资源化方法 实验16.1 垃圾堆肥中纤维素分解菌的计数和分离 实验16.2 利用酒精废液生产单细胞蛋白 实验16.3 固体废物的固体发酵参考文献
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