第54页
NADPH
读过 基因工程原理(上册)
- 页码:第54页
1984年,D.C.Schwartz和C.R.Cantor发明的脉冲电场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,简称PFGE)技术,可以成功地用来分离整条染色体这样的超大分子量的DNA分子。在常规的琼脂糖凝胶电泳中,超过一定大小范围的所有的双链DNA分子,都是按相同的速率迁移的。这是因为它们在单向恒定电场的作用下,仅以“一端向前”(end-on)的方式游动穿过整个胶板。而在脉冲电场中,DNA分子的迁移方向是随着所用的电场方向的周期性变化而不断改变的。在标准的PFGE中,头一个脉冲的电场方向与核酸移动方向成45°夹角,而下一个脉冲的电场方向与核酸移动方向在另一侧亦成45°夹角(图2-3)。由于加压在琼脂糖凝胶上的电场方向、电流大小、及作用时间都在交替地变换着,这就使得DNA分子能够随时地调整其游动方向,以适应凝胶孔隙的无规则变化。与分子量较小的DNA分子相比,分子量较大的DNA分子需要更多的次数来更换其构型和方位,以使其可以按新的方向游动。因此,在琼脂糖介质中的迁 移速率也就显得更慢一些,从而达到了分离超大分子量DNA分子的目的。已报道,应用脉冲电场凝胶电泳技术,可成功地分离到分子量高达10^7bp的DNA大分子。
13人阅读
说明 · · · · · ·
表示其中内容是对原文的摘抄